带有荧光素酶标签的EV71型全长感染性克隆的制备方法及应用专利登记公告

专利名称：带有荧光素酶标签的EV71型全长感染性克隆的制备方法及应用

摘要：本发明公开了一种带有荧光素酶标签的EV71全长感染性克隆的制备方法及应用，属于生物技术领域。其步骤是：（1）总RNA的提取；（2）EV71的RT-PCR扩增；（3）EV71亚克隆的构建；（4）含有EV71基因的重组克隆的构建（5）带有Rluc标签的EV71全长感染性克隆的构建。通过细胞病变、Rluc活性的检测、病毒蚀斑和药物抑制等实验证明成功获得带有标签的EV71全长感染性克隆。本发明在动物模型、病毒复制与致病机理、药物筛选和药物作用机制、疫苗和诊断试剂的研发等方面具有广泛的应用价值。

专利类型：发明专利

专利号：CN201110444376.8

专利申请（专利权）人：中国科学院武汉病毒研究所

专利发明（设计）人：张波;史佩勇;许文波;袁志明;邓成林;商宝娣;贾凡

主权项：一种带有荧光素酶标签的EV71型全长感染性克隆的制备方法，其步骤是：(1)总RNA的提取：取140ul的EV71病毒液，按照QIAamp?Viral?RNA试剂盒说明书的要求抽提EV71的RNA；(2)EV71的RT?PCR扩增：根据EV71基因的特性，将该基因分为了四个部分，分别命名为F1、F2、F3和F4，以步骤(1)中的总RNA为模版，采用RT?PCR分别获得DNA片段F1、F2、F3和F4，片段的序列为SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：3、SEQ?ID?NO：4所

专利地区：湖北