导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法专利登记公告

专利名称：导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法

摘要：导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法，涉及一种导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法。是要解决目前使用大肠杆菌作为宿主表达clfA基因，研制基因工程疫苗存在侵袭性和毒性问题。方法：提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA；以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增，获得clfA基因；提取保存于大肠杆菌JM109中的质粒pMG36c；分别对clfA基因和质粒pMG36c进行双酶切，将酶切后产物连接；将连接产物转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中，采用氯霉素筛选转化子，构建重组质粒；将

专利类型：发明专利

专利号：CN201210065114.5

专利申请（专利权）人：黑龙江省科学院微生物研究所;哈尔滨工业大学

专利发明（设计）人：曲晓军;崔艳华;张超;孙建华;夏海华;王金英;于冲

主权项：导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法，其特征在于导入clfA基因的乳酸乳球菌基因工程菌株的构建方法，按以下步骤进行：一、提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA；二、以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板，以MG?CLaF和MG?CLaR2为引物，进行PCR扩增；三、将PCR扩增产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，然后采用胶回收试剂盒进行纯化，获得clfA基因；四、采用质粒提取试剂盒提取保存于大肠杆菌JM109中的质粒pMG36c；五、分别对clfA基因和质粒pMG36c进行双酶切，将酶切后的clfA基因和质

专利地区：黑龙江