一种提取赤潮甲藻核酸的方法专利登记公告
专利名称:一种提取赤潮甲藻核酸的方法
摘要:一种提取赤潮甲藻核酸的方法,涉及赤潮生物核酸提取方法,需要建立一种提取赤潮甲藻核酸的方法,本发明采取藻液,并进行显微镜计数,其特征是取10mL藻液于50mL离心管中,置于100℃沸水浴中,然后分别在不同煮沸时间取样,然后进行显微镜细胞计数,计算破碎率,同时以灭过菌的去离子水做空白对照,检测核酸浓度;算出每毫升藻液中煮沸破碎前数目(N0)和破碎后的数目(N1),计算破碎率;扩增塔玛亚历山大藻和环状异帽藻ITS序列,取5uL扩增混合物用琼脂糖电泳检验,得到扩增片段,回收该扩增片段并测序、比对后确认扩增序列为目
专利类型:发明专利
专利号:CN200910046877.3
专利申请(专利权)人:中国水产科学研究院东海水产研究所
专利发明(设计)人:张凤英;马凌波;石彦红;徐兆礼
主权项:一种提取赤潮甲藻核酸的方法,采取藻液,并进行显微镜计数,其特征是取10mL藻液于50mL离心管中,置于100℃沸水浴中,然后分别在不同煮沸时间10min,30min,60min,90min取样,然后进行显微镜细胞计数,计算破碎率,同时以灭过菌的去离子水做空白对照,检测核酸浓度;显微镜下用血球计数板计数,算出每毫升藻液中煮沸破碎前数目(N0)和破碎后的数目(N1),按下式计算破碎率:破碎率=(N0-N1)/N0×100%;以不同时间煮沸获得的藻细胞液为模板,扩增塔玛亚历山大藻和环状异帽藻ITS序列,PCR引
专利地区:上海
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