一种利用大肠杆菌表达烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白的方法专利登记公告
专利名称:一种利用大肠杆菌表达烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白的方法
摘要:本发明公开了一种利用大肠杆菌表达烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白(GRP)的方法,包括表达菌株筛选、培养基优化、蛋白提取缓冲液配制,其特征在于:具体包括下列工序:A、提取烟草总RNA,逆转录成cDNA,PCR扩增出GRP蛋白基因;B、构建重组表达质粒pGEX4T-1-GRP;C、转化大肠杆菌表达菌株、小量诱导筛选高效表达菌株、大量诱导表达;D、蛋白提取和E、蛋白活性鉴定。本发明通过筛选大肠杆菌高效表达菌株,优化培养基,克隆基因构建出GRP基因重组表达质粒pGEX4T-1-GRP,再用阳性质粒对菌种为roset
专利类型:发明专利
专利号:CN201010110901.8
专利申请(专利权)人:云南省烟草农业科学研究院
专利发明(设计)人:李文正;陈禹保;刘勇;陈学军;卢秀萍;唐启慧
主权项:一种利用大肠杆菌表达烟草富含甘氨酸RNA结合蛋白的方法,包括表达菌株筛选、培养基优化、蛋白提取缓冲液配制,其特征在于:具体包括下列工序:A、提取烟草总RNA,逆转录成cDNA,PCR扩增出GRP蛋白基因;B、构建重组表达质粒pGEX4T-1-GRP;C、转化大肠杆菌表达菌株、小量诱导筛选高效表达菌株、大量诱导表达;D、蛋白提取;E、蛋白活性鉴定。
专利地区:云南
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