一种大肠杆菌包涵体复性的方法专利登记公告

专利名称：一种大肠杆菌包涵体复性的方法

摘要：本发明涉及涉及的是生物工程下游蛋白质纯化领域，具体涉及大肠杆菌蛋白表达形成包涵体的复性方法，其特征在于具体的工艺步骤如下：(1)包涵体蛋白的收集，4℃??5000rpm/min??6min离心收集菌体，将菌体超声破碎，4℃??8000rpm/min??30min高速冷冻离心得到P003B蛋白包涵体；(2)包涵体的纯化，重悬包涵体于50mL洗涤缓冲液，溶解杂蛋白及其他杂质从而纯化P003B包涵体；(3)包涵体复性，在4℃，溶解的包涵体通过恒流泵，用复性缓冲液，缓慢稀释至缓冲液pH为8.0，并不断搅拌，本发明

专利类型：发明专利

专利号：CN201010139322.6

专利申请（专利权）人：上海瑞基生物科技有限公司

专利发明（设计）人：王志超

主权项：一种大肠杆菌包涵体复性的方法，其特征在于具体的工艺步骤如下：(1)弃去上清重悬沉淀于100mL包涵体溶解缓冲液，50mM??Tris，500mMNaCl，2M??Urea，1mM??PMSF??pH??8.0；(2)将重悬的包涵体分成10份，分别调节包涵体溶解缓冲液pH到3.0，4.0，5.，0，6.0，7.0，8.0，9.0，10.0，11.0，12.0；(3)分别超声溶解，400瓦，工作1秒，间息1秒，总时长1分钟；(4)分别4℃8000rpm/min??30min高速冷冻离心；(5)分别取各不同pH

专利地区：上海