一种小环肽的制备方法专利登记公告

专利名称：一种小环肽的制备方法

摘要：本发明涉及一种小环肽的制备方法，包括：(1)用限制性内切酶分别对扩增出的含intein基因组DNA和载体pET-LIc进行酶切重组，得到质粒pE-INN和pE-INC；(2)利用限制性内切酶将蛋白质内含子的N端剪接活性区域IN和C端剪接活性区域IC进行重排；(3)将需环化目的蛋白插入到上述蛋白质内含子剪接活性区域中间并在两端加上断裂的纯化标签；(4)将上述处理后的目的蛋白诱导融合蛋白体内表达；(5)对目的环化蛋白进行纯化，洗脱。本发明简单，成本简单，产率高，适合于工业化生产。

专利类型：发明专利

专利号：CN201010139904.4

专利申请（专利权）人：东华大学

专利发明（设计）人：孟清;施长华;李梦梦

主权项：一种小环肽的制备方法，包括：(1)利用PCR技术，根据intein设计两对引物并分别在两端加上NdeI，AgeI和AgeIXhoI酶切位点，对含有intein的基因组DNA进行PCR扩增，将PCR产物进行双酶切，载体pET-LIL利用同样的两个酶进行双酶切，然后将intein片段和双切后的载体按摩尔比2∶1进行连接，得到了质粒pE-INN和pE-INC；(2)将质粒pE-INN和pE-INC作为模板，利用限制性内切酶进行双酶切，分别回收含有intein的片段后，按摩尔比1∶2进行连接，转化感受态细胞后得到

专利地区：上海