牦牛铜锌超氧化物歧化酶重组表达蛋白质专利登记公告
专利名称:牦牛铜锌超氧化物歧化酶重组表达蛋白质
摘要:本发明公开了一种牦牛铜锌超氧化物歧化酶重组表达系统的构建方法及重组蛋白质。用逆转录聚合酶链式反应克隆牦牛肝脏Cu,Zn-SODcDNA,连接到原核表达载体pET22b(+),构建重组原核表达载体,并转化到大肠杆菌构建基因工程菌,对基因工程菌进行IPTG诱导表达并纯化Cu,Zn-SOD蛋白质,得到的蛋白质用尿素浓度梯度法透析复性并用邻苯三酚自氧化法进行酶活性测定。本发明提供了一种高效稳定的牦牛Cu,Zn-SOD重组表达系统的构建方法及重组表达的牦牛Cu,Zn-SOD蛋白质,本发明为丰富SOD资源,降低生产成
专利类型:发明专利
专利号:CN201010169323.5
专利申请(专利权)人:西南民族大学
专利发明(设计)人:徐亚欧;毛德才;毛亮;袁忠;杨德孝;郑玉才
主权项:一种构建含有牦牛Cu,Zn-SOD cDNA的表达载体的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)根据奶牛Cu,Zn-SOD cDNA序列,用DNAsis for Windows Ver 2.5设计一对PCR引物,引物序列如下:上游引物P1: 5′-CATGCCATGGCGACGAAGGCCGTCTGCGTGC-3′下游引物P2: 5′-CCCAAGCTTGAATGTTTACTTGGCAATTC-3′(2)提取牦牛肝脏RNA,以提取的牦牛肝脏RNA为模板,在引物P1和P2的引导下进行逆转录PCR扩增;(3)将R
专利地区:四川
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