一种农杆菌介导的叶片转化培育柑橘转基因植株的方法专利登记公告

专利名称：一种农杆菌介导的叶片转化培育柑橘转基因植株的方法

摘要：本发明属于植物转基因技术领域，具体地，本发明涉及柑橘转基因植株的培育方法。公开了一种利用农杆菌介导，以柑橘试管苗叶片为外植体培育转基因柑橘植株的方法，其步骤包括遗传转化、筛选再生、PCR检测和GFP荧光观察。其特征在于，通过农杆菌介导将GFP报告基因导入受体柑橘叶片，对影响叶片转化的不同因素进行筛选，利用卡那霉素作为选择剂，对转化后的受体细胞进行筛选，通过PCR检测，GFP荧光检测等辅助方法筛选得到转基因柑橘植株。本发明为柑橘遗传转化创新种质资源提供了新的技术平台。

专利类型：发明专利

专利号：CN201110004838.4

专利申请（专利权）人：华中农业大学

专利发明（设计）人：刘继红;艾山;付行政

主权项：一种利用农杆菌介导的柑橘叶片转化培育转基因植株的方法，其步骤包括遗传转化及植株鉴定，其特征在于，采用离体柑橘无菌苗叶片作为遗传转化的受体材料，经农杆菌侵染、共培养、恢复培养、选择和生根培养，将GFP报告基因导入受体，利用卡那霉素作为选择剂对转化后的受体细胞进行筛选，通过GFP荧光观察和PCR检测筛选得到转基因植株；其步骤如下：1)将柑橘种子在离体培养基上播种，获得柑橘无菌苗叶片；2)将步骤1)的无菌苗叶片用刀刻伤，置于OD600为0.2～1的农杆菌菌液中浸泡10分钟；将侵染过的叶片接入共培养培养基中，在2

专利地区：湖北