用毕赤酵母分泌表达重组人去乙酰化酶6专利登记公告

专利名称：用毕赤酵母分泌表达重组人去乙酰化酶6

摘要：用毕赤酵母分泌表达重组人去乙酰化酶6。本发明属生物技术领域，具体涉及一种重组人去乙酰化酶6(Recombinant?HumanSertuin-6，rhSIRT6)及其制备方法和应用。本发明应用RT-PCR方法，扩增得到人去乙酰化酶6(hSIRT6)cDNA，并将其中的几处密码子经过同义突变，突变成毕赤酵母偏好密码子，将突变的基因mSIRT6与毕赤酵母(Pichia?pastoris)表达载体pPICZ?α重组，获得表达质粒pPICZ?α-mSIRT6，转化毕赤酵母菌X33，筛选出高效表达工程菌株。实现在毕

专利类型：发明专利

专利号：CN201110066688.X

专利申请（专利权）人：张洁

专利发明（设计）人：张洁

主权项：一种制备抗衰老因子，即重组人去乙酰化酶6(Recombinant?Human?Sertuin?6，rhSIRT6)的方法，其特征在于采取下列步骤：(1)分离组织总RNA，用RT?PCR的方法克隆hSIRT6?cDNA基因，得到的基因序列是SEQ?1；(2)同义突变hSIRT6?cDNA基因，得到mSIRT6基因；(3)mSIRT6基因与表达载体重组；(4)用上述重组表达载体电穿孔法转化宿主细胞，使mSIRT6基因以多拷贝形式与宿主染色体发生重组；(5)诱导培养宿主细胞；(6)从培养液中回收和纯化蛋白产物。

专利地区：上海