卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法专利登记公告

专利名称：卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法

摘要：本发明提供了一种卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法。本发明将制备好的含卵巢癌细胞全基因组DNA的胶块置于0.5％琼脂糖凝胶的点样孔中，用相同浓度的琼脂糖封闭加样孔；在10℃的0.5×TBE电泳缓冲液中适宜电泳条件下先进行第一向FIGE模式电泳，随后调整方向进行第二向CHEF模式电泳，分离大片段DNA分子。之后将目的片段回收，用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测回收所得DNA片段大小。本发明的方法通过双向电泳的方式对脉冲场凝胶电泳的优化可实现对双微体简便、高效的分离，且DMs的纯度高并为后续DMs相关实

专利类型：发明专利

专利号：CN201110340834.3

专利申请（专利权）人：哈尔滨医科大学

专利发明（设计）人：傅松滨;岳志超;计薇;金焰;关荣伟;白静;陈峰

主权项：一种卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法，其特征在于，步骤如下：(1)样品制备人卵巢癌细胞UACC?1598在含10％FBS的RPMI?1640培养基中，于5％CO2、37℃条件下进行培养；收集对数生长期、汇合率为70％～80％的人卵巢癌细胞UACC?1598，计数后重悬于PBS，使细胞密度为1～2×108细胞/mL，并在37℃水浴中孵育；加入等体积37℃的1.4％低熔点琼脂糖，迅速混匀后倒入洁净模具中，4℃放置10～15min使其凝固；将胶块从模具中取出后置于3～5倍体积的细胞裂解液中于37℃

专利地区：黑龙江