人源凝血因子Ⅺ催化结构域的表达、纯化及结晶专利登记公告

专利名称：人源凝血因子Ⅺ催化结构域的表达、纯化及结晶

摘要：本发明提供了人凝血因子XI催化结构域突变体。本发明提供了一种人凝血因子XI催化结构域突变体(N432Q/N473Q/C482S)在巴斯德毕氏酵母中高效稳定表达、纯化以及结晶的技术方法。本发明培养的人凝血因子XI催化结构域突变体晶体空间群为P31，单胞参数为：α＝β＝90°，γ＝120°。该蛋白不需要任何激活就有丝氨酸蛋白酶活性，可用于人凝血因子XI抑制剂的高通量筛选；而其所结晶出的高分辨率晶体，则为人凝血因子XI抑制剂的设计、开发提供一个研发平台。

专利类型：发明专利

专利号：CN201110347809.8

专利申请（专利权）人：中国科学院福建物质结构研究所

专利发明（设计）人：黄明东;江龙光;袁彩;陈宏炜;王宇;赵宝玉

主权项：人凝血因子XI催化结构域突变体的表达方法，其特征在于：本突变体在巴斯德毕氏酵母体系中表达，并且包含如下步骤：(1)以肝库为模板，用PCR法从肝库扩增出FXI催化结构域，正向引物S(5‘?3’)：CCGCTCGAGAAAAGAATCGTTGGAGGAACTGC；反向引物AS(5‘?3’)：ACGCGTCGACTCACACTGCTTGAGTTTTCTCCA，引物分别含Xho?I和Sal?I位点(用下划线标注)，用Xho?I和Sal?I双酶切FXI催化结构域片段和载体pPICZαA；将处理好的片段和载体用T4D

专利地区：福建