一种基因消除PCR的方法专利登记公告

专利名称：一种基因消除PCR的方法

摘要：本发明公开了一种基因消除PCR的方法，本项发明可以消除混合基因群体中的非目标基因。本项发明的技术要点是把非目标基因做成或人工合成短序列基因消除引物，把含目标基因的混合基因群体酶切加上带有一个碱基误配的限制性酶切位点及带有Poly(dA)的接头，经过纯化作为模板，在PCR反应中，通过基因消除引物与模板退火延伸恢复正确的酶切位点，然后用耐热的限制性酶酶切从而消除非目标基因的接头，使其无法得到扩增。以上反应是利用PCR仪做如下循环：94℃，30秒；60℃，40秒；75℃，8分钟，经过12至18个循环，富集目标基

专利类型：发明专利

专利号：CN201110382308.3

专利申请（专利权）人：华中农业大学

专利发明（设计）人：桓娇娇;吕茹婧;张婷婷;程梦兰;董五辈

主权项：一种基因消除PCR的方法，其步骤是：(1)基因消除PCR模板的制备：a.限制性核酸内切酶ApeK?I和Mse?I消化含目标基因的混合基因群体；b.设计并合成四条寡核苷酸链O1，O2，O3，O4并制备接头，与上述(1)中a步骤的限制性酶切片段连接；c.Oligo?dT柱子纯化上述(1)中b步骤加上接头的片段作基因消除PCR模板；(2)基因消除PCR引物的制备：a.限制性核酸内切酶ApeK?I和Mse?I消化不含目标基因的混合基因群体；b.设计并合成四条寡核苷酸链O5，O6，O7，O8并制备接头，与上述(2)

专利地区：湖北