一种大肠杆菌NrfA基因表达蛋白多克隆抗体及其制备方法专利登记公告

专利名称：一种大肠杆菌NrfA基因表达蛋白多克隆抗体及其制备方法

摘要：一种大肠杆菌NrfA基因表达蛋白的多克隆抗体制备方法：以大肠杆菌基因组DNA为模板，PCR扩增得到NrfA基因编码区，构建pET-28a（+）-NrfA表达载体，转入大肠杆菌BL21（DE3）后，经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白；再免疫新西兰雄兔，制备多克隆抗体；免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测，其效价为1：204900，经Westernblotting分析，抗体的特异性较好。该多克隆抗体可用于研究其他微生物中亚硝酸盐还原酶与大肠杆菌亚硝酸盐还原酶之间的相关结构与功能。也为进一步深入研究大肠杆菌亚硝酸

专利类型：发明专利

专利号：CN201110407260.7

专利申请（专利权）人：上海应用技术学院

专利发明（设计）人：龚钢明;何婷婷;高然

主权项：一种大肠杆菌NrfA基因表达蛋白多克隆抗体，其特征在于通过如下方法制备：（1）、大肠杆菌基因组DNA的提取按Omega公司细菌基因组DNA提取试剂盒的使用方法提取大肠杆菌基因组DNA；所述的大肠杆菌为BL21（DE3）；（2）、目的基因NrfA的PCR扩增上游引物为CGGGATCCATGACAAGGATAAAAATAAACG；下游引物为GGCCTCGAGTTATTGGCTTAACAGACC；以步骤（1）提取的大肠杆菌基因组为模板，通过PCR扩增目的基因片段，PCR反应条件为：94℃预变性4min；94℃变

专利地区：上海