ERα36缺陷型SMMC-7721稳定转染细胞株及其构建方法专利登记公告

专利名称：ERα36缺陷型SMMC-7721稳定转染细胞株及其构建方法

摘要：本发明公开了一种ERα36缺陷型SMMC-7721稳定转染细胞株的构建方法，具体是将SEQID?NO：1和SEQ?ID?NO：2的核苷酸序列片段，插入含GFP绿色荧光的pRNAT-U6.1/Neo表达载体，再转入SMMC-7721细胞株，在SMMC-7721细胞中表达shRNA，经阳性细胞克隆筛选后，得到SMMC-7721/Sh36细胞株，使得siRNA靶向沉默了内源性ERα36的表达量30％以上，且95％以上的细胞表达绿色荧光蛋白的稳定转染细胞。这一细胞模型可用于研究ERα36与肝癌的相关性及其机理；也

专利类型：发明专利

专利号：CN201110455979.8

专利申请（专利权）人：辽宁师范大学

专利发明（设计）人：邹伟;崔风宫;张媛;方晨

主权项：ERα36缺陷型SMMC?7721稳定转染细胞株的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)设计对应ER?α36基因的shRNA的两条单链DNA模板，其碱基序列为SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2；(b)构建含有上述碱基序列SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2的pRNAT?U6.1/Neo重组质粒；(c)利用如步骤(b)获得的重组质粒转染宿主细胞SMMC?7721得到的重组细胞株；(d)将步骤(c)所得重组细胞株经过G418筛选培养基培养，每3～5天更换一次筛选培养基，筛选10～14

专利地区：辽宁