共转染药物代谢酶和转运体的细胞模型的构建及应用专利登记公告

专利名称：共转染药物代谢酶和转运体的细胞模型的构建及应用

摘要：本发明提供一种共转染CYP3A4和MDR1细胞模型的构建，是先将P-gp的基因克隆到pcDNA3.1(+)上，转染MDCK细胞，经过G418筛选出单克隆细胞，得到MDCK-MDR1细胞株，然后将CYP3A4克隆到带有潮霉素B筛选标记的载体pcDNA3.1(+)/Hygro上，转染MDCK-MDR1细胞，经过潮霉素B筛选，得到共转染CYP3A4和MDR1细胞。MDCK-MDR1/CYP3A4被中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为：CCTCCC2011119，保藏日期：2011年12月15日。本发明构建的模

专利类型：发明专利

专利号：CN201210006590.X

专利申请（专利权）人：浙江大学

专利发明（设计）人：曾苏;刘瑶;胡海红;余露山;蒋惠娣;周慧;徐思云;王鹭;何新

主权项：一种共转染药物代谢酶CYP3A4和转运体MDR1细胞模型，通过以下构建步骤实现：（1）将MDCK细胞以105／孔种于六孔板，培养48小时，用LipofectamineTM?2000试剂将表达载体pcDNA3.1(+)／MDRl转染MDCK细胞，方法参照转染试剂说明书，转染24小时后换液，并加G418进行筛选，以浓度600ug／mL筛选96小时后升至800ug／mL筛选24小时；（2）将存活的细胞转移至培养瓶内培养，以600ug／mL的浓度培养二十天左右，按有限稀释法接种于96孔板，获得抗性单克隆，通过在m

专利地区：浙江