一种提取并测定茶树中谷胱甘肽过氧化物酶活性的方法专利登记公告
专利名称:一种提取并测定茶树中谷胱甘肽过氧化物酶活性的方法
摘要:本发明属于酶检测领域,公开了一种提取并测定茶树中谷胱甘肽过氧化物酶活性的方法。该方法本发明以茶树叶片为提取材料,包含标准曲线制作,GSH-Px粗酶液提取,其中用含1mmol/L?EDTA-2Na,4%的PPVP的pH6.2的0.2mol/L磷酸缓冲液进行提取,测得的GSH-Px活性最大;10%TCA配制时操作简单,沉淀效果较好;显色反应在6min时达最大值,且5-硫代-2-硝基苯阴离子在412nm处有最大吸光值。本实验方法具备材料容易获得、操作简单、容易控制、测定结果可靠的特点。
专利类型:发明专利
专利号:CN201210009772.2
专利申请(专利权)人:南京农业大学
专利发明(设计)人:房婉萍;周琳;陈暄;王玉花;张彩丽;黎星辉
主权项:一种提取并测定茶树中谷胱甘肽过氧化物酶活性的方法,其特征在于包含如下步骤:(1)标准曲线的制作:配制一系列GSH浓度为0?300μmol/L的GSH标准液,分别取各浓度的GSH标准液2.0ml,加0.32mol/L?Na2HPO42.5ml、4mol/L?NaOH?0.12ml和DTNB?0.5ml,显色6~7min,于412nm比色,同双蒸水调零,以OD值为纵坐标,GSH浓度为横坐标,制标准曲线,获得的标准曲线R2值都能达到0.999以上,且重复性较好;(2)GSH?Px粗酶液提取:在pH6.2?pH7
专利地区:江苏
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