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一种牛α-乳白蛋白的定量检测方法专利登记公告


专利名称:一种牛α-乳白蛋白的定量检测方法

摘要:本发明涉及一种运用酶解-液相色谱质谱联用技术,对乳及乳制品中热变性和非变性的牛α-乳白蛋白进行定量检测的方法。包括如下步骤:取一定量的乳或乳制样品,用水溶解,稀释成总蛋白含量约为1mg/mL的溶液。定容后准确吸取500μL,加入内标物,用二硫苏糖醇(DTT)还原二硫键,用碘代乙酰胺(IAA)烷基化保护被还原产生的巯基,再用胰蛋白酶进行恒温、恒时酶解;酶解产物用反相液相色谱分离,质谱多反应监测模式(MRM)进行检测,内标法计算结果。该方法的定量限为0.001g/100g;在添加水平为0.2、1.7、5.0g

专利类型:发明专利

专利号:CN201210015743.7

专利申请(专利权)人:浙江省疾病预防控制中心

专利发明(设计)人:任一平;赖世云;张京顺;蔡增轩;黄百芬;韩见龙

主权项:一种牛α?乳白蛋白的定量检测方法,所述方法包括:(1)样品处理:取待测样品1~2克,用水溶解并稀释至总蛋白含量为1mg/mL,准确吸取500μL上述样品溶液,加入20μL浓度为25μmol/L的内标物溶液、480μL浓度为500mmol/L的NH4HCO3溶液和10μL浓度为500mmol/L的DTT溶液,50℃恒温30min后取出冷却至室温,加入30μL浓度为500mmol/L的IAA溶液,暗室静置30分钟,加入10μL浓度为100mmol/L的CaCl2溶液和30μL浓度为100μg/mL的胰蛋白酶溶

专利地区:浙江