重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法专利登记公告

专利名称：重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法

摘要：本发明公开了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法，特点是包括将人工合成的人源LECT2基因插入胞外表达载体pPICZαA中构建重组表达质粒的步骤；酶切线性化后电击导入毕赤酵母X33中，获得重组工程菌株的步骤；经过摇瓶发酵和甲醇诱导，实现重组人源LECT2蛋白的分泌表达的步骤；再利用柱层析进行纯化制备得到纯度为95%以上的重组人源LECT2蛋白的步骤，优点是首次提出了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中得分泌表达和纯化制备方法，采用毕赤酵母大量表达高活性的重组人源LECT2蛋白，具有稳定、产量高

专利类型：发明专利

专利号：CN201210018774.8

专利申请（专利权）人：宁波大学

专利发明（设计）人：陈炯;史雨红;章瑞程;陆新江;李长红;李明云

主权项：一种重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法，其特征在于步骤如下：（1）构建重组表达质粒抽取人外周血细胞中RNA，逆转录合成cDNA得到人源LECT2蛋白基因序列，登录号为NM002302，以此为模板设计引物进行PCR扩增人源LECT2蛋白，将含人源LECT2基因的PCR扩增产物用限制性内切酶EcoRI和KpnI双酶切，将用相同限制性内切酶EcoRI和KpnI双酶切的质粒pPICZαA与酶切后的PCR产物用T4?DNA连接酶连接，转化大肠杆菌DH5a中，得到重组表达质粒pPICZα?LECT2；

专利地区：浙江