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一种巨尾桉转化方法专利登记公告


专利名称:一种巨尾桉转化方法

摘要:本发明提供了一种安全高效的巨尾桉遗传转化方法,以便解决现有技术中所述农杆菌介导法转化桉树所遇到的问题。本发明通过构建以安全性标记基因PMI(6-磷酸甘露糖异构酶)为筛选标记的表达载体,通过大量的组培试验及对遗传转化方法的改进,最终将目的基因AmCBL1成功转入巨尾桉中。该目的基因来源于超旱生植物沙冬青(Ammopiptanthusmongolicus(Maxim.)Cheng?f.),由其特异性启动子AmCBL1P所驱动。

专利类型:发明专利

专利号:CN201210019229.0

专利申请(专利权)人:北京林业大学

专利发明(设计)人:夏新莉;尹伟伦;庞涛

主权项:一种巨尾桉转化方法,包括以下步骤:(1)将目的基因连入含有6?磷酸甘露糖异构酶(PMI)的表达载体pCAMBIA1301上,将所述载体导入根癌农杆菌EHA105;(2)将所述农杆菌于含有100mg/mL卡那霉素和50mg/mL利福平的YEB培养基中,28℃,180转/分钟,避光摇至OD值为0.4~0.6;8000转/分钟,离心10分钟,沉淀收集菌体;(3)使用含有乙酰丁香酮50mg/L、2?(N?吗啡啉)乙磺酸150mg/L和半乳糖1.8g/L的无蔗糖MS液体培养基悬浮菌体,悬浮后的菌液OD值仍调至0.4

专利地区:北京