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无CO2条件下诱导间充质干细胞分化成骨细胞的培养方法专利登记公告


专利名称:无CO2条件下诱导间充质干细胞分化成骨细胞的培养方法

摘要:本发明提供了一种无CO2条件下诱导间充质干细胞分化为成骨细胞的培养方法,所述方法包括:将第3代的人骨髓间充质干细胞,在5%CO2、37℃条件下培养过夜;待细胞完全贴壁并生长到大约80%融合时,更换诱导培养基,在无CO2、37℃条件下培养14~21天,获得成骨细胞;所述诱导培养基由基础培养基添加胎牛血清、青霉素、链霉素、地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C制成,所述基础培养基按如下终浓度组成配制:碳酸氢钠0.41g/L;十二水合磷酸氢二钠1.5g/L;磷酸二氢钾0.07g/L;氯化钠8.17g/L;溶剂为不含

专利类型:发明专利

专利号:CN201210025449.4

专利申请(专利权)人:浙江大学

专利发明(设计)人:王金福;陈键

主权项:一种无CO2条件下诱导间充质干细胞分化为成骨细胞的培养方法,所述方法包括:(1)收集培养至第3代的人骨髓间充质干细胞,用含10%胎牛血清、100U/ml青霉素和100U/ml链霉素的α?MEM培养液调节细胞密度至1×105个/ml,制备得到细胞悬液;(2)将步骤(1)细胞悬液以0.5ml/孔接种至24孔板中,5%CO2、37℃条件下培养过夜;(3)待细胞完全贴壁并生长到80%融合时,更换诱导培养基,在无CO2、37℃条件下培养14~21天,获得成骨细胞;所述诱导培养基由基础培养基添加胎牛血清、青霉素、链霉

专利地区:浙江