百日咳杆菌69KD外膜蛋白的纯化方法专利登记公告
专利名称:百日咳杆菌69KD外膜蛋白的纯化方法
摘要:本发明属于蛋白分离纯化领域,涉及百日咳杆菌的69KD外膜蛋白的工业化大规模分离纯化方法。所述方法包括:a.将百日咳杆菌CS菌体用含1mol/L至2mol/L氯化钠的pH8.8的缓冲液在40至60℃浸提30分钟至3小时,离心,收集上清,得到含有所述69KD外膜蛋白的菌体裂解物上清;b.在含有所述69KD外膜蛋白的菌体裂解物上清中加入硫酸铵使硫酸铵浓度达到15%重量/体积至25%重量/体积,静置1小时至8小时,离心,收集上清;c.在步骤b收集的上清中加入硫酸铵使硫酸铵浓度达到30%重量/体积至38%重量/体积
专利类型:发明专利
专利号:CN201210027545.2
专利申请(专利权)人:北京天坛生物制品股份有限公司
专利发明(设计)人:肖詹蓉;王玲
主权项:一种提纯百日咳菌的69KD外膜蛋白的方法,所述方法包括以下步骤:b.在含有所述69KD外膜蛋白的菌体裂解物上清中加入硫酸铵使硫酸铵浓度达到15%重量/体积至25%重量/体积,静置1小时至8小时,离心,收集上清;c.在步骤b收集的上清中加入硫酸铵使硫酸铵浓度达到30%重量/体积至38%重量/体积,静置1小时至8小时,离心,弃上清,收集沉淀;d.以Tris?HCl缓冲液溶解步骤c中收集的沉淀并透析除去硫酸铵;e.过DEAE?sepharose离子交换柱,用线性梯度氯化钠浓度从0mol/L至1mol/L的缓冲液
专利地区:北京
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