一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的纯化方法专利登记公告
专利名称:一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的纯化方法
摘要:本发明公开了一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的纯化方法,本方法使用羟基磷灰石进行Hib荚膜多糖的纯化,过程如下:将Hib荚膜多糖粗糖溶解于20mm磷酸盐缓冲液,将得到的Hib荚膜多糖粗糖溶液上样于羟基磷灰石层析柱;使用20mm磷酸盐缓冲液洗2个柱体积,收集流穿峰;用高盐缓冲液洗脱结合的蛋白质,将收集的流穿峰用G-25葡萄糖凝胶柱进行缓冲液置换,最终得到Hib荚膜多糖精糖原液。本发明的优点在于采用羟基磷灰石进行荚膜多糖的纯化,避免了使用苯酚对环境和人体带来的危害,并且得到的Hib荚膜多糖纯度可达到行业标准。
专利类型:发明专利
专利号:CN201210037245.2
专利申请(专利权)人:成都欧林生物科技股份有限公司
专利发明(设计)人:吴强;罗力心;关晓峰;伍长华
主权项:一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:A.装填一根羟基磷灰石层析柱,用20mM磷酸盐缓冲液平衡2个柱体积直至基线平稳;B.将50~150mg?b型流感嗜血杆菌(Hib)荚膜多糖粗糖溶解于50ml?20mM?磷酸盐缓冲液,将得到的Hib荚膜多糖粗糖溶液上样于层析柱上;C.使用20mM磷酸盐缓冲液洗2个柱体积,收集流穿峰;D.用高盐缓冲液洗脱结合在层析柱上的蛋白质,再生层析柱;E.将收集的流穿峰用G?25葡萄糖凝胶柱进行缓冲液置换,流动相为无热原的注射用水,收集含Hib荚膜多糖的洗
专利地区:四川
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