一种克隆细菌基因cDNA全长的方法专利登记公告
专利名称:一种克隆细菌基因cDNA全长的方法
摘要:一种克隆细菌基因cDNA全长的方法,属于生物基因技术领域,其方法是:a、总RNA的提取,利用细菌总RNA提取试剂盒或TRIzol试剂提取细菌总RNA;b、总RNA的自连环化,c、第一链cDNA的合成;d、朝向5’UTR和3’UTR的引物分别命名为IP1和IP2;以IP1和IP2为引物,获得基因5’UTR和3’UTR序列;e、双链cDNA片段的连接与测序,利用载体通用引物进行测序;f、利用DNA序列分析软件将步骤e中所获得的序列与基因编码区序列进行拼接,便可获得基因的cDNA全长。有益效果是:cRT-PCR
专利类型:发明专利
专利号:CN201210041168.8
专利申请(专利权)人:长春理工大学
专利发明(设计)人:张晓;于源华;王保学;张昊;姚健;张淑华;何秀霞;葛淑敏
主权项:一种克隆细菌基因cDNA全长的方法,其方法是:a、总RNA的提取,利用细菌总RNA提取试剂盒或TRIzol试剂提取细菌总RNA;b、总RNA的自连环化,自连环化按如下方法进行,取浓度为600?1000ng/μL的总RNA溶液5μL,T4RNA连接酶buffer?2μL,T4RNA连接酶5U,DNA酶抑制剂1μL,加dd?H2O至20μL;16℃连接20h后,将连接产物用10μL氯仿抽提一次,然后用2.5倍体积无水乙醇沉淀RNA,用5μL?ddH2O重溶RNA备用;c、第一链cDNA的合成,将自连环化的总R
专利地区:吉林
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