一种快速检测重组蛋白表达量的方法专利登记公告
专利名称:一种快速检测重组蛋白表达量的方法
摘要:本发明提供了一种快速检测重组蛋白表达量的方法。本发明将含有目标蛋白表达盒的载体转入表达菌株后涂布于平板培养基上并诱导蛋白表达,随后将平板上的克隆影印到印迹膜上,通过裂解步骤后,克隆中的蛋白固定至印迹膜上。随后利用针对表达载体上特定标签的抗体或针对目标蛋白的特异性抗体进行Western?Blotting检测,检测信号的情况即反映了被影印的平板上克隆中的目标蛋白的表达情况。利用本发明提供的方法,可以根据检测信号快速从大量克隆中筛选到表达量高的克隆。
专利类型:发明专利
专利号:CN201210072148.7
专利申请(专利权)人:生工生物工程(上海)有限公司
专利发明(设计)人:李彬;李威
主权项:一种快速检测重组蛋白表达量的方法,包括以下步骤:a)将待检测的基因工程菌涂布或点种于平板培养基上,并在适合目标蛋白表达的条件下进行培养至单克隆菌落生长至合适大小,获得克隆平板;b)将克隆平板上的菌斑影印到印迹膜上;c)对印迹膜上的菌斑进行原位裂解;d)利用针对目标蛋白或与目标蛋白融合表达的蛋白标签的抗体作为一抗对印迹膜进行Western?Blotting检测;e)根据Western?blotting检测结果获知各单克隆的表达量高低,Western?blotting检测信号强度越强,则对应克隆中目标蛋白的表
专利地区:上海
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