微量游离mRNA提取和富集方法专利登记公告
专利名称:微量游离mRNA提取和富集方法
摘要:本发明涉及微量游离mRNA提取和富集方法。本发明是对含微量游离mRNA的液体离心取上清,加入到Trizol?LS溶液中震荡,加入氯仿,剧烈震荡,离心,吸取水相层加入70%乙醇,混匀,转移到RNA?pure?link?mini?kit收集管中离心,使用wash?buffer1和2洗涤滤网和滤网上的RNA,离心,干燥滤网和RNA,加无RNA酶水溶解RNA,离心,加DNA酶,终止DNA酶反应,离心,获得最终富集并纯化的RNA。本发明解决了血浆游离mRNA的检测存在检出率很低,标本量需求大,重复性差等缺陷。本发明
专利类型:发明专利
专利号:CN201210083189.6
专利申请(专利权)人:南京大学医学院附属鼓楼医院
专利发明(设计)人:刘宝瑞;沈洁;魏嘉
主权项:微量游离mRNA提取和富集方法,其步骤在于:(1)抽取含微量游离mRNA的液体,两次离心,获取上清;(2)取上清加入到Trizol?LS溶液中,室温震荡;(3)向其中加入氯仿,剧烈震荡;(4)离心,吸取水相层至新管;(5)加入70%乙醇,混匀;将含有乙醇和RNA的液体转移到带有滤网的收集管中,离心;(6)洗涤滤网和滤网上的RNA;(7)离心,干燥滤网和RNA;(8)加无RNA酶水溶解RNA,离心;(9)加入DNA酶;(10)终止DNA酶反应,离心,获得最终富集并纯化的RNA,以其为模板,反转录为cDNA,
专利地区:江苏
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