乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法专利登记公告

专利名称：乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法

摘要：本发明公开了一种乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法，属于生物工程技术领域。体外合成包括目的基因hBPI的CDS序列，该CDS序列上游添加了XhoI酶切位点、Kozak序列、牛β-酪蛋白信号肽，下游添加了XhoI酶切位点；并将此体外合成序列定向克隆至经XhoI酶切的pBC1-loxp-neo-loxp-pBD载体；经菌液PCR和测序验证，获得了构建正确的人杀菌/通透性增强蛋白乳腺特异表达载体pBC1-loxp-Neo-loxp-hBPI。本发明经细胞C-127水平的功能验证表明该载体基因构建合理、

专利类型：发明专利

专利号：CN201210100640.0

专利申请（专利权）人：安徽农业大学

专利发明（设计）人：张运海;章孝荣;桂涛;李运生;刘亚;陈建文;章美玲;张宇;刘星;方富贵;丁建平

主权项：乳腺特异表达人杀菌通透性增强蛋白载体构建方法，包括如下步骤：(1)设计合成如下序列：XhoI酶切位点+Kozak序列+牛β?酪蛋白信号肽+人BPI的CDS序列+XhoI酶切位点，体外合成并克隆至pUC57载体的EcoRV酶切位点处，命名为pUC57?hBPI；(2)使用限制性内切酶SalI分别酶切pUC57?hBPI、pBC1?loxp?neo?loxp?pBD；胶回收插入pUC57载体的体外合成的外源片段、pBC1?loxp?Neo?loxp片段；使用T4连接酶连接上述回收的片段；(3)上述连接产物转化

专利地区：安徽