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成年小鼠神经元的机械分离方法专利登记公告


专利名称:成年小鼠神经元的机械分离方法

摘要:本发明涉及生物医学领域,公开了一种成年小鼠神经元的机械分离方法,方法如下:在冰浴组织培养液中采用电子振动切片机制作350-375m厚的成年小鼠脑组织切片,室温条件下保存30-60分钟,于无菌条件下,将脑组织切片放入含有木瓜蛋白酶的组织培养液中,控制温度为32.2-35.3℃,保存30分钟,将脑切片置于盛有HEPES缓冲液的细胞培养皿内,选择所需分离的神经区域,使用细胞分离器分离神经元;筛选健康神经元;本发明通过将原代培养的化学分离方法融入到机械细胞分离中,将脑切片预先用木瓜蛋白酶处理,使中年及老年小鼠的健

专利类型:发明专利

专利号:CN201210102857.5

专利申请(专利权)人:浙江大学

专利发明(设计)人:张若煜;陈怀红

主权项:一种成年小鼠神经元的机械分离方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤a:在冰浴组织培养液中采用电子振动切片机制作350?375m厚的成年小鼠脑组织切片,室温条件下保存30?60分钟,备用;步骤b:于无菌条件下,将步骤a中的脑组织切片放入含有木瓜蛋白酶的组织培养液中,控制温度为32.2?35.3℃,保存30分钟,备用;?步骤c:将脑切片置于盛有HEPES缓冲液的细胞培养皿内,选择所需分离的神经区域,使用细胞分离器分离神经元,频率为50?60Hz,摆动幅度2?4mm,分离针移动速度0.8?1.5mm/s;步骤d:

专利地区:浙江