山羊乳腺上皮细胞的建系方法专利登记公告

专利名称：山羊乳腺上皮细胞的建系方法

摘要：本发明公开了一种山羊乳腺上皮细胞建系方法。该方法在取材上选用了妊娠期山羊乳房组织；采用组织快法在普通细胞培养皿进行原代培养，将组织块干涸培养时间适当延长；干涸培养结束后立即添加适量乳腺上皮细胞培养液，后期半量换液，直至细胞铺满皿底；通过胰酶差速消化法纯化乳腺上皮细胞；使用高密度连续传代培养法建立起山羊乳腺上皮细胞系并冷冻保存。所述普通细胞培养皿未使用胶原覆盖；乳腺上皮细胞培养液中仅添了FBS、ITS、EGF。本发明具有简单、高效、低成本的建立山羊乳腺上皮细胞系的优点，为开展山羊乳腺发育、泌乳调控机制、乳腺

专利类型：发明专利

专利号：CN201210113304.X

专利申请（专利权）人：安徽农业大学

专利发明（设计）人：桂涛;张运海;章孝荣;李运生;方富贵;刘亚;吴蓉花;陶佳;张远亮;丁建平

主权项：一种山羊乳腺上皮细胞的建系方法，其特征在于，包括以下步骤：(一)山羊乳腺上皮细胞的分离(1)选用已经与妊娠期山羊相分离的乳房组织，经杀菌和清洗处理后放入含有青霉素和链霉素的DPBS溶液中进行洗涤，然后去除脂肪和结缔组织，留下白色颗粒状腺泡组织块，再放入含青霉素和链霉素的DPBS溶液中洗涤2遍，最后转入不含青霉素和链霉素的DPBS溶液洗涤一遍；(2)将适量组织块放入离心管，滴加数滴血清湿润，将其剪成1mm3小块，用移液器吸出适量的剪碎后组织均匀涂布于培养皿，间距保持1cm2左右；(3)37℃、5％CO2、饱

专利地区：安徽