利用锌指核酸酶敲除牛整合素β6亚基基因的方法专利登记公告

专利名称：利用锌指核酸酶敲除牛整合素β6亚基基因的方法

摘要：本发明公开了一种利用锌指核酸酶(ZFNs)敲除牛整合素β6亚基基因的方法，其是根据牛整合素β6基因序列，设计可特异性识别该基因的锌指核酸酶ZFNs，构建表达载体并转染牛的细胞，如成纤维细胞，获得整合素β6亚基基因敲除的细胞。本发明利用ZFNs介导的基因敲除技术，设计合成了可特异性识别并切割整合素β6亚基基因的一对ZFNs，并成功获得整合素β6亚基双等位基因敲除的转基因克隆牛。利用一次转染，得到双等位基因敲除的细胞克隆，省去了药物筛选过程，促进了细胞单克隆的形成，提高了后续转基因胚胎的发育率。在转基因动物体

专利类型：发明专利

专利号：CN201210114541.8

专利申请（专利权）人：山东省农业科学院奶牛研究中心

专利发明（设计）人：何洪彬;武建明;王洪梅;刘晓;刘文浩;方永志;仲跻峰

主权项：一种利用锌指核酸酶敲除牛整合素β6亚基基因的方法，其是根据牛整合素β6基因序列，设计可特异性识别该基因的锌指核酸酶，构建ZFN重组表达载体并转染牛的细胞，获得整合素β6亚基基因敲除的细胞，其特征在于：所设计的一对ZFNs可特异性识别并剪切整合素β6亚基基因，其识别及剪切的β6亚基基因序列如下：TGTTCTTTCTATGTCtaggaaGGAATGATCACGTACAAG；其中，大写字母表示的序列为识别的序列，小写字母表示的序列为剪切的序列。

专利地区：山东