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猪鼻支原体巢式PCR检测方法专利登记公告


专利名称:猪鼻支原体巢式PCR检测方法

摘要:本发明涉及一种引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、耳炎等的猪鼻支原体的巢式PCR检测方法,主要步骤包括:1)提取猪鼻支原体样品的DNA,低温保存备用;2)以一对特异性引物MhrP01、MhrP02对猪鼻支原体样品进行第一轮PCR扩增;3)以另一对特异性引物MhrP03、MhrP04对猪鼻支原体第一轮PCR产物进行第二轮PCR扩增;4)对扩增产物进行电泳检测。如果存在346bp的特异性条带,则确定所检测的病菌为猪鼻支原体。本方法在微量病原菌的存在下,都可以准确检出,只要有102CCU/mL病原菌存在,即可检测出。

专利类型:发明专利

专利号:CN201210115339.7

专利申请(专利权)人:江苏省农业科学院

专利发明(设计)人:白方方;邵国青;武昱孜;刘茂军;冯志新;熊祺琰

主权项:一种猪鼻支原体的巢式PCR检测方法,其特征在于包括下列步骤:1)提取猪鼻支原体样品的DNA,低温保存备用;2)以一对特异性引物Mhr?P01、Mhr?P02对猪鼻支原体样品进行第一轮?PCR扩增;其中:上游引物?Mhr?P01的序列为:5’?GCATCTATATTTTCGCCAATAGC?3’;下游引物?Mhr?P02的序列为:5’?AGCTAGAGTTTCATCATTACC?3’;所述第一轮?PCR扩增方法是:在PCR试剂管Ⅰ中的反应液总体积为20μl,包括:待测样品猪鼻支原体DNA模板提取液0.5~1

专利地区:江苏