一种用于羊泰勒虫病检测的间接ELISA方法专利登记公告

专利名称：一种用于羊泰勒虫病检测的间接ELISA方法

摘要：本发明公开了一种利用TlSP检测羊泰勒虫病的间接ELISA方法，包括如下步骤：①包被；②封闭；③与一抗结合；④与二抗结合；⑤显色；⑥终止；⑦结果判定：样品的效价表示为：(OD样品-OD阴性)÷(OD阳性-OD阴性)，若效价小于0.20，为阴性；效价在0.20～0.30之间为可疑；效价大于0.30为阳性；本发明选取中国羊泰勒虫病的流行虫种-吕氏泰勒虫的TlSP基因，通过克隆表达，以纯化的TlSP蛋白作为诊断抗原，采用间接ELISA模式，研制出吕氏泰勒虫TlSP抗体检测试剂盒。该法操作简单，耗时短，成本低，高

专利类型：发明专利

专利号：CN201210121339.8

专利申请（专利权）人：中国农业科学院兰州兽医研究所

专利发明（设计）人：殷宏;罗建勋;李有全;何海宁;刘志杰;杨吉飞;关贵全;陈泽;牛庆丽;马米玲;刘爱红;刘军龙;任巧云;鲁炳义

主权项：一种利用TlSP检测羊泰勒虫病的间接ELISA方法，其特征在于，其包括如下步骤：①包被：以包被缓冲液将表达产物TlSP蛋白稀释至工作浓度，加入96孔酶标板，每孔50μL，4℃过夜；以洗涤缓冲液PBST洗涤，拍干；②封闭：每孔加入50μL封闭液，37℃封闭40分钟；以洗涤缓冲液PBST洗涤，拍干；③与一抗结合：待检血清样品及任选的阳性和阴性对照用血清稀释液(含5％脱脂奶粉，1％大肠杆菌萃取物的封闭液)1∶100稀释，每孔加入50μL，37℃结合1小时；以洗涤缓冲液PBST洗涤，拍干；④与二抗结合：兔抗绵羊I

专利地区：甘肃