基因重组人胸腺素β4的制备方法专利登记公告

专利名称：基因重组人胸腺素β4的制备方法

摘要：一种基因重组人胸腺素β4的制备方法，包括基因的获得、载体pPIC9K与I型人胶原蛋白和毕赤酵母电转化人胸腺素β4的连接、多拷贝插入重组子的筛选、基因重组人胸腺素β4融合蛋白毕赤酵母发酵、基因重组人胸腺素β4的纯化步骤。本发明利用人I型人胶原蛋白在毕赤酵母的高表达特性引导人胸腺素β4在毕赤酵母中稳定高效表达。在融合蛋白的I型人胶原蛋白前导肽与人胸腺素β4之间引入肠激酶切位点，避免了人胸腺素β4因为分子量较小，表达、纯化过程中所遇到的难题，增加了表达量，简化了纯化程序，提高了产品的提取纯化效率，可用于制备基因

专利类型：发明专利

专利号：CN201210149956.9

专利申请（专利权）人：西安华澳丽康生物工程有限公司

专利发明（设计）人：侯增淼;高恩;李晓颖;李哲;赵金礼

主权项：一种基因重组人胸腺素β4的制备方法，其特征在于它包括下述步骤：（1）基因的获得从离体新生儿胎盘组织中提取总RNA，反转录获得cDNA，设计I型人胶原蛋白基因PCR扩增引物，引入限制性酶切位点Xho?I、EcoR?I，I型人胶原蛋白基因PCR扩增引物的序列为：F:CGCTCGAGGGTGTTGCTGGTCCCAAGGGTR:CGGAATTCTGTCTCACCCTTGTCACCACG采用PCR方法扩增获得I型人胶原蛋白基因，I型人胶原蛋白基因的核苷酸序列为:1????CTCGAGGGTG?TTGCTGGTCC

专利地区：陕西