一种快速检测水环境中肠道病毒主要基因型的方法专利登记公告

专利名称：一种快速检测水环境中肠道病毒主要基因型的方法

摘要：本发明公开了一种快速检测水环境中肠道病毒主要基因型的方法，该方法根据道病毒RNA在5’非编码区这一段核酸的保守性，利用肠道病毒通用引物进行半巢式PCR扩增，结合DGGE分析方法来鉴定水环境中主要肠道病毒的基因型。由于采用了半巢式PCR，大幅度提高了水环境中肠道病毒检测技术的灵敏度，并具有良好的特异性，同时结合DGGE方法能分离出不通基因型肠道病毒的PCR扩增片段，缩短了确定水环境中肠道病毒主要基因型分析鉴定的时间，避免了大通量测序所产生的昂贵费用，且与环境中常见的其他病原微生物没有交叉反应。适用于地表水、

专利类型：发明专利

专利号：CN201210157470.X

专利申请（专利权）人：西安建筑科技大学

专利发明（设计）人：吉铮;王晓昌;三浦尚之;佐野大辅;徐丽梅

主权项：一种快速检测水环境中肠道病毒主要基因型的方法，其特征在于，包括下列步骤：步骤一，样品采集：用预先灭菌的采样瓶采集水样，在水面下0.3m处取水样，水样采集后放入4℃冰箱内保存；步骤二，水样的浓缩：将含有肠道病毒的水样加入聚乙二醇（PEG）6000和NaCl，使水样中的聚乙二醇（PEG）6000浓度为8%（vol/vol），NaCl的浓度为2.3%（wt/vol），于4℃，80rpm搅拌混匀，12h后，于9,000×g，4℃离心30min，收集沉淀，将沉淀用1mL超纯水吹打混匀；步骤三，RNA提取：利用RNA

专利地区：陕西