冻存和复苏脐带全细胞并分离和扩增干细胞的方法专利登记公告

专利名称：冻存和复苏脐带全细胞并分离和扩增干细胞的方法

摘要：本发明涉及脐带全细胞分离、冻存和复苏以及复苏后干细胞分离和扩增的方法，其包括如下步骤：对脐带组织进行消毒和清洗；将组织剪成块状，消化处理1.5小时；配制脐带组织冻存液备用；将消化处理得到的全细胞和冻存液加入冻存管中，在4℃的温度条件下低温冷藏0.5小时，再-80℃的温度条件下冷冻1天，然后液氮中冷冻备用；需要时将脐带全细胞从液氮中取出，恒温水浴解冻，利用间充质干细胞培养基进行点滴法清洗，复苏的脐带全细胞可通过细胞培养和细胞传代扩增间充质干细胞。本发明方法可有效保护冻存脐带组织，且方便复苏使用，尤其适合复苏

专利类型：发明专利

专利号：CN201210159919.6

专利申请（专利权）人：博雅干细胞科技有限公司

专利发明（设计）人：林卓衡;陈俊峯;朱业峰;周丹

主权项：处理脐带全细胞的方法，该方法包括：(A)以下对脐带离体新鲜组织全细胞进行分离和冻存的步骤：(1)消毒和清洗：用消毒液(例如酒精)对脐带组织表面进行消毒，将脐带剪开，平铺，通过缓冲液(例如PBS缓冲液)清洗脐带组织，以减少脐带组织上红细胞；(2)消化处理：将步骤(1)得到的脐带组织剪成组织块，将组织块放入消化酶溶液(例如其非限制性地包含I型胶原酶、DMEM?F12)中，消化处理0.5?3小时(例如1.5小时)，过滤清除组织块，加入间充质干细胞培养基以终止消化，然后对消化得到的细胞进行细胞清洗；(3)配制脐带

专利地区：江苏