构建pGM-CSF-EGFP-IRES-Rae1-IL21载体的方法专利登记公告

专利名称：构建pGM-CSF-EGFP-IRES-Rae1-IL21载体的方法

摘要：本发明构建了一种pGM-CSF-EGFP-IRES-Rae1-IL21载体，其中，GM-CSF和IL-21基因的功能是促进机体免疫系统的激活，尤其是NK细胞和CTL细胞的激活；Rae-1基因转染到肿瘤细胞后，主要促进肿瘤细胞表达NKG2D配体（即Rae-1），促使肿瘤细胞被机体免疫系统尤其是NK细胞和CTL细胞的识别；绿色蛋白（EGFP）基因主要便于监测基因在体内的转染情况，可在荧光显微镜下观察各组织的基因转染情况。

专利类型：发明专利

专利号：CN201210175428.0

专利申请（专利权）人：程明荣

专利发明（设计）人：程明荣

主权项：一种构建pGM?CSF?EGFP?IRES?Rae1?IL21载体的方法，其特征在于，步骤包括：针对GM?CSF基因、Rae?1基因、EGFP基因、IL21基因的CDS区序列提供PCR引物，通过PCR扩增在上述基因的5’端和3’端均添加酶切位点；PCR扩增EGFP基因的DCs区，将EGFP的PCR产物进行和pIRES载体分别进行双酶切，然后将EGFP和pIRES酶切产物进行连接，得到pEGFP?IRES质粒；将GM?CSF基因与pEGFP?IRES质粒连接，然后分别插入Rae?1基因和IL21基因。

专利地区：上海