一种表达植物抗性诱导因子的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法专利登记公告

专利名称：一种表达植物抗性诱导因子的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法

摘要：一种表达植物抗性诱导因子的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法，涉及毕赤酵母基因工程菌株的构建方法。是要解决目前绿木霉的植物抗性诱导因子基因表达量低，无法满足其研究与应用的问题。方法：提取棘孢木霉菌丝总RNA，反转录；PCR扩增，纯化扩增产物得目的基因EplT4；目的基因与载体连接构建重组载体；转化，提取阳性转化子质粒，将质粒线性化并回收；转化；将转化细胞涂在上长出重组菌，将重组菌转接到含梯度浓度抗生素的培养基上，在最高浓度抗生素的培养基上生长的菌落即为基因工程菌株Pp-EplT4。本发明方法获得的毕赤酵母基因

专利类型：发明专利

专利号：CN201210176806.7

专利申请（专利权）人：哈尔滨工业大学

专利发明（设计）人：杨谦;王允;宋金柱;从华;孙艳;曹广丽;姚琳;杨萍;赵磊;王震宇;刘冰南

主权项：一种表达植物抗性诱导因子的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法，其特征在于表达植物抗性诱导因子的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法，按以下步骤进行：一、将棘孢木霉接种到PDA培养基中进行培养，3天后将孢子用无菌水清洗，接入PDA液体培养基中，28℃培养3天后离心收集菌丝，用Trizol提取菌丝的总RNA，然后用反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA；二、以获得的cDNA为模板进行PCR扩增，将扩增产物用1％琼脂糖凝胶电泳检测，然后用胶回收试剂盒进行纯化，获得目的基因EplT4，对目的基因EplT4进行测序鉴定；三、

专利地区：黑龙江