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一种应用自诱导培养基和双温度调控策略生产胞外普鲁兰酶的方法专利登记公告


专利名称:一种应用自诱导培养基和双温度调控策略生产胞外普鲁兰酶的方法

摘要:一种应用自诱导培养基和双温度调控策略生产胞外普鲁兰酶的方法,属于微生物发酵生产普鲁兰酶的技术领域。本发明将黑座克雷伯氏菌(Klebsiellavariicola)CCTCC?NO:M2012108普鲁兰酶编码基因插入表达载体pET28a(+)中构建重组质粒,并转化大肠杆菌获得含有目的普鲁兰酶基因的重组菌株E.coliBL21(DE3)/pET28a(+)-pulA。利用自诱导培养基,并采用先37℃培养2~4小时后25℃继续培养48~72小时的双温度调控方式,将重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)/p

专利类型:发明专利

专利号:CN201210187066.7

专利申请(专利权)人:江南大学

专利发明(设计)人:聂尧;徐岩;陈文波

主权项:一种应用自诱导培养基和双温度调控策略生产胞外普鲁兰酶的方法,其特征在于将重组大肠杆菌E.?coli?BL21?(DE3)/?pET28a(+)?pul?A接种于自诱导培养基中,并采用双温度调控方式,即将接种之后的自诱导培养基于37℃、200?rpm培养2~4小时后,将培养的温度降低到25℃继续培养48~72小时,培养结束后,收集发酵上清液获得胞外普鲁兰酶;步骤为:(1)将来源于黑座克雷伯氏菌(Klebsiella?variicola)CCTCC?NO:M?2012108的普鲁兰酶基因在大肠杆菌中进行重组表

专利地区:江苏