Cav-1稳定低表达的SMMC-7721细胞系及其构建方法专利登记公告

专利名称：Cav-1稳定低表达的SMMC-7721细胞系及其构建方法

摘要：本发明公开一种Cav-1低表达的SMMC-7721KD细胞系的构建方法。具体采用Cav-1SiRNA干扰技术构建Cav-1稳定低表达的SMMC-7721KD细胞系。经过设计引物、扩增目的片段，构建Cav-1SiRNA重组质粒，进行质粒转染，然后对转染后的细胞进行博莱霉素筛选，传代，建立稳定低表达的SMMC-7721KD细胞系，最终获得阳性重组细胞系，能够沉默SMMC-7721细胞中Cav-1的表达80％左右，并且Cav-1稳定低表达。Cav-1稳定低表达的SMMC-7721细胞系可作为模型，进行Cav-1

专利类型：发明专利

专利号：CN201110455368.3

专利申请（专利权）人：辽宁师范大学

专利发明（设计）人：邹伟;刘艳;王洋;史丹

主权项：Cav?1稳定低表达的SMMC?7721细胞系的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)设计对应Cav?1基因的shRNA的两条单链DNA模板，其碱基序列为SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2；(b)构建含有上述碱基序列SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2的psiRNA?hHlzeo?G2重组质粒；(c)利用如步骤(b)获得的重组质粒转染宿主细胞SMMC?7721得到的重组细胞株；(d)将步骤(c)所得重组细胞株经过Zeocin筛选培养基培养，细胞24小时一次换液，四天传代1次，传至

专利地区：辽宁