在哺乳动物细胞中高效表达猪圆环病毒2型核衣壳蛋白的方法专利登记公告

专利名称：在哺乳动物细胞中高效表达猪圆环病毒2型核衣壳蛋白的方法

摘要：本发明公开了一种在哺乳动物细胞中高效表达猪圆环病毒2型核衣壳蛋白的方法。该方法通过抑制猪圆环病毒2型核衣壳蛋白的泛化作用(Ubiquitination)，增强其稳定性，从而提高病毒蛋白在哺乳动物细胞中表达水平。方法的步骤为：1）猪圆环病毒2型SX04株全基因组序列的克隆；2）含有猪圆环病毒2型（PCV2）核衣壳蛋白基因的真核表达质粒的构建；3）将上述质粒转染猪肾细胞PK15，转染后24小时，在细胞培养液中加入MG132；4）继续培养48小时后，收集细胞，免疫印迹检测表达蛋白。相对于普通的真核表达方法，该方

专利类型：发明专利

专利号：CN201210018722.0

专利申请（专利权）人：杭州贝尔塔生物技术有限公司

专利发明（设计）人：李龙;于涟;方立

主权项：?一种在哺乳动物细胞中高效表达猪圆环病毒2型核衣壳蛋白的方法，其特征在于，方法的步骤为：1）猪圆环病毒2型?SX04株全基因组序列的克隆；2）含有猪圆环病毒2型核衣壳蛋白基因的真核表达质粒pCI?PCVCapHA的构建；3）将pCI?PCVCapHA转染猪肾细胞PK15，转染后24小时，在细胞培养液中加入MG132；4）继续培养48小时后，通过抑制蛋白酶体的活性，稳定真核细胞中的猪圆环病毒2型核衣壳蛋白，收集细胞，免疫印迹检测表达蛋白。

专利地区：浙江