抑制CYP3A4的shRNA表达质粒及构建和应用专利登记公告
专利名称:抑制CYP3A4的shRNA表达质粒及构建和应用
摘要:本发明提供抑制CYP3A4的shRNA表达质粒,根据干扰片段设计原则和CYP3A4的序列,通过Blast软件排除与基因组其他基因具有同源性的序列,获得三个符合要求的shRNA模板序列,将合成的上述shRNA模板分别克隆,通过氨苄抗性筛选和测序,成功获得三种shRNA表达质粒。在不同的细胞模型中,shRNA单独或混合表达质粒均能够较好地抑制CYP3A4mRNA表达(55%)和蛋白表达(50%),且无脱靶效应,具有良好的专属性。因此,本发明提供的三种shRNA表达质粒可以作为CYP3A4的特异性抑制剂,用于C
专利类型:发明专利
专利号:CN201210017177.3
专利申请(专利权)人:浙江大学
专利发明(设计)人:曾苏;徐思云;余露山;蒋惠娣;周慧;胡海红;王鹭
主权项:抑制CYP3A4的shRNA表达质粒,通过以下方法构建:(1)在Genebank中查找CYP3A4的序列NM.017460,根据干扰片段设计原则:从转录本mRNA的AUG起始密码开始,寻找“AA”二连序列,并记下其3'端的19个碱基序列,以GC含量在45%?55%左右的siRNA作为潜在的siRNA靶位点,并依据CYP3A4的序列,利用设计软件,并通过Blast软件排除与基因组其他基因具有同源性的序列,获得三个符合要求的shRNA模板序列,作用位点分别为773、923和1191;(2)用无菌水将化学合成的
专利地区:浙江
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